Il metodo PCR si riferisce alla reazione a catena della polimerasi, che può aumentare notevolmente la quantità di tracce di DNA. Quando viene utilizzato per rilevare il virus COVID-19, poiché il virus COVID-19 è un virus a RNA, è necessario effettuare la trascrizione inversa dell'RNA virale in DNA prima di eseguire il rilevamento tramite PCR.
Il principio di rilevazione della PCR fluorescente è che, con il progredire della PCR, i prodotti di reazione continuano ad accumularsi e l'intensità del segnale fluorescente aumenta proporzionalmente. Infine, la variazione della quantità di prodotto viene monitorata attraverso la variazione dell'intensità di fluorescenza, ottenendo così una curva di amplificazione della fluorescenza.
Questo è attualmente il metodo più comunemente utilizzato per
Rilevamento dell'acido nucleico del virus COVID-19
Tuttavia, i seguenti fattori possono causare errori nei risultati del test:
Conservazione impropria o mancata presentazione al test: i virus a RNA si degradano facilmente. Pertanto, dopo aver ottenuto i campioni dei pazienti, è necessario conservarli in modo standardizzato e sottoporli al test il prima possibile. In caso contrario, è probabile che il risultato del test sia impreciso.
Interpretazione errata dei risultati: i prodotti di test attualmente approvati sono tutti selezionati in base al frame di lettura aperto 1a/b, alla proteina dell'envelope e alla proteina del nucleocapside del genoma del nuovo coronavirus. Tuttavia, la progettazione dei primer e delle sonde di rilevamento per i diversi prodotti è diversa e vi sono differenze nel rilevamento e nell'interpretazione dei segmenti a singolo bersaglio, dei segmenti a doppio bersaglio e dei segmenti a tre bersagli. Pertanto, se l'interpretazione non è strettamente conforme alle diverse istruzioni, potrebbe portare a una valutazione errata del risultato.
Kit di rilevamento degli anticorpi IgM del nuovo coronavirus (immunocromatografia a fluorescenza)
Il principio del nuovo kit di rilevamento degli anticorpi IgM contro il coronavirus (immunocromatografia a fluorescenza) si basa sulla tecnologia di marcatura fluorescente a secco e sulla tecnologia immunocromatografica. Utilizza sangue intero, siero o plasma come campioni ed è dotato di un immunodosaggio a fluorescenza completamente automatico. La puntura e l'introduzione del campione completamente automatiche, realizzano il principio "campione in entrata, risultato in uscita", evitando al massimo la generazione di aerosol e riducendo il rischio di inquinamento per l'operatore e l'ambiente.
Si tratta di una nuova tecnologia di rilevamento a membrana basata sulla risposta immunitaria specifica dell'antigene e dell'anticorpo.
Il kit contiene una scheda di test, la scheda di test include un tampone di campionamento, un tampone fluorescente, un tampone di rilevamento, una ventosa e una piastra inferiore, il tampone fluorescente è rivestito con uno strato di anticorpi marcati con microsfere fluorescenti e gli anticorpi includono l'antigene ricombinante SARS-CoV-2.
Nuovo coronavirus (2019-nCoV) IgM
kit di rilevamento degli anticorpi
(oro colloidale)
Il principio di rilevamento del nuovo kit di rilevamento degli anticorpi IgM del coronavirus (2019-nCoV) (metodo dell'oro colloidale) è che il principio di rilevamento dell'anticorpo IgM marcato con oro colloidale e il nuovo antigene del coronavirus sono rivestiti sulla membrana di nitrocellulosa, utilizzando il metodo indiretto dell'immunocromatografia con oro colloidale. Il principio è raggiungere lo scopo di rilevare il nuovo anticorpo IgM del coronavirus nel siero umano.
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Kit di rilevamento degli anticorpi IgM del nuovo coronavirus (test immunoenzimatico)
Kit di immunodosaggio enzimatico per il nuovo anticorpo IgM del coronavirus e relativo metodo di preparazione, che coinvolge il campo della biomedicina, inclusi coniugato enzimatico, diluente del campione, soluzione di controllo negativo, soluzione di controllo positivo, soluzione di substrato A, soluzione di substrato B e concentrato. La soluzione di lavaggio, la soluzione di terminazione e la piastra di rivestimento pre-rivestita con l'antigene del virus COVID-19 vengono testate mediante la reazione immunospecifica dell'antigene e dell'anticorpo per determinare qualitativamente la presenza di un nuovo anticorpo IgM del coronavirus nel campione di prova, che presenta elevata specificità e resistenza. Le caratteristiche di forte interferenza e la struttura dell'applicazione sono semplici, i costi di rilevamento sono bassi e l'accuratezza è buona. Il nuovo tipo di metodo di rilevamento immunoenzimatico dell'anticorpo IgM del coronavirus della presente invenzione viene rilevato mediante la reazione immunospecifica dell'antigene e dell'anticorpo e presenta elevata specificità, caratteristiche di elevata accuratezza, passaggi semplici, design ragionevole, adatto alla promozione.
Nello specifico, si tratta di un immunodosaggio enzimatico che utilizza il principio del metodo indiretto per ottenere il rilevamento qualitativo di nuovi anticorpi IgM contro il coronavirus in campioni di siero o plasma.
Kit di rilevamento degli anticorpi del nuovo coronavirus (metodo della chemiluminescenza)
Il principio del nuovo kit di rilevamento degli anticorpi contro il coronavirus (metodo a chemiluminescenza) si basa sulla marcatura della proteina ricombinante del virus con sfere magnetiche ad alta tecnologia, che vengono utilizzate per legare l'anticorpo virale IgM nel campione di sangue, per poi utilizzare l'anticorpo secondario per identificarlo. L'anticorpo secondario è accoppiato alla fosfatasi alcalina, che genera un segnale luminoso dopo l'aggiunta del substrato. Lo strumento a chemiluminescenza rileva i fotoni attraverso un tubo fotomoltiplicatore (PMT) ad alta sensibilità per ottenere un rilevamento ad alta sensibilità a livello di pg (picogrammi).
Caratteristiche dei vari metodi di rilevamento
Il metodo dell'oro colloidale è facile da usare e può essere interpretato visivamente. Generalmente, il test può essere completato in circa 15 minuti;
La cromatografia a immunofluorescenza è comoda quanto il metodo dell'oro colloidale e la rilevazione è rapida, ma richiede l'interpretazione dello strumento;
L'immunoanalisi enzimatica può essere interpretata da un lettore di micropiastre convenzionale. Generalmente, la sensibilità è elevata, ma il tempo di rilevamento è più lungo (circa 1,5 ore) e richiede numerose fasi operative. È necessario adottare misure preventive per evitare infezioni durante l'operazione.
Il metodo della chemiluminescenza è generalmente più sensibile. L'analizzatore immunoenzimatico a chemiluminescenza automatico viene utilizzato per completare la rilevazione senza troppe operazioni manuali. Il tempo di rilevazione è generalmente di circa mezz'ora.
Ambito di applicazione:
Viene utilizzato per il rilevamento qualitativo in vitro degli anticorpi IgM/IgG del nuovo coronavirus (2019-nCoV) in campioni di siero umano, plasma e sangue intero venoso.