Uno è simile alla cartina tornasole all'oro colloidale comunemente utilizzata nei test del virus dell'influenza.
La cartina reattiva all'oro colloidale, infatti, utilizza una forma colloidale di oro per etichettare le biomacromolecole e fissarla sulla cartina reattiva in PVC, lasciare un foro per il campione, impostare una linea di rilevamento e una linea di controllo qualità, in modo che il campione venga aggiunto al foro. Successivamente, aggiungere alcune gocce di mezzo liquido e lasciare che il liquido scorra sul tampone assorbente all'altra estremità della cartina reattiva. La cromatografia viene eseguita sulla cartina reattiva, solitamente per 10-15 minuti. Dopo che si verifica la reazione immunitaria sulla cartina reattiva, è possibile osservare l'aggregazione dell'oro colloidale. Se è presente una banda rossa in quella posizione, visibile a occhio nudo, si conosce il risultato del test.
Attualmente, sono stati pubblicati e segnalati due tipi di strisce reattive all'oro colloidale per il nuovo coronavirus. Una è quella che rileva l'antigene del nuovo coronavirus.
Questo metodo utilizza il metodo del doppio anticorpo sandwich, ovvero, per lo stesso antigene, ci sono due anticorpi sulla cartina reattiva, ma in posizioni diverse. L'anticorpo marcato con oro colloidale è uno degli anticorpi contro l'antigene, sul tampone legante della cartina reattiva.
Ad esempio, tamponi faringei, tamponi nasali e campioni di liquido di lavaggio alveolare vengono gocciolati nel foro del campione, quindi vengono lasciate cadere alcune gocce di terreno di coltura. Se nel campione clinico è presente un antigene virale specifico, questo si legherà all'oro presente sul tampone. Riconosciuto dall'anticorpo bersaglio, si forma un complesso antigene-anticorpo. A questo punto, continuare a far scorrere il tampone nella direzione del tampone assorbente. Sulla linea di rilevamento, è presente un altro anticorpo contro l'antigene. L'epitopo riconosciuto da questo anticorpo è diverso dall'anticorpo marcato con oro, quindi lo stesso antigene può essere influenzato simultaneamente da questi due anticorpi. Identificato. A questo punto, una parte dell'anticorpo marcato con oro verrà intrappolata nella linea di rilevamento, in modo che il colore si sviluppi sulla linea di rilevamento.
Naturalmente, la quantità di anticorpo marcato con oro è sicuramente in eccesso, quindi non solo verrà intercettata sulla linea di rilevamento, ma continuerà a fluire in direzione del tampone assorbente. A questo punto, c'è una linea di controllo qualità. Sulla linea, ci sono anticorpi specificamente diretti contro gli anticorpi marcati con oro (ovvero, anti-anticorpo, che è essenzialmente un anticorpo, ma l'oggetto antigenico che riconosce è anch'esso un anticorpo). Poiché la linea di controllo qualità ha un'elevata capacità di riconoscere gli anticorpi marcati con oro, questa linea mostrerà sicuramente colore. Questo è anche il principio del controllo qualità. Se questa linea non mostra colore, il risultato del test non è valido.
Pertanto, il giudizio negativo e positivo è molto semplice: entrambe le linee sono colorate positive; solo la linea di controllo qualità è colorata negativa; gli altri due casi sono esperimenti non validi.
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Test antigenico Covid con oro colloidale
può essere utilizzato per lo screening precoce delle infezioni ed è un efficace complemento alla rilevazione degli acidi nucleici (PCR).
Il metodo descritto sopra è il metodo sandwich a doppio anticorpo per la rilevazione degli antigeni, mentre l'altro metodo consiste nel rilevare gli anticorpi IgM specifici per il nuovo coronavirus nel sangue del paziente. Questa è la cartina al tornasole all'oro colloidale per il metodo di cattura delle IgM.
Innanzitutto dobbiamo comprendere la legge della risposta anticorpale umana:
Quando il corpo umano è esposto ad antigeni estranei, il primo anticorpo prodotto è l'IgM (Ig sta per immunoglobulina), ma deve essere prodotto circa una settimana dopo l'esposizione del corpo allo stimolo del patogeno, quindi in termini di intervallo di tempo di rilevamento, non è affidabile quanto l'acido nucleico. Il test è rapido.
L'IgM è in realtà la forma di secrezione del recettore delle cellule B (BCR) sulla superficie dei linfociti B. Si tratta di una pattuglia preparata in anticipo durante lo sviluppo e la maturità del corpo umano, ma è equivalente a una recluta e non ha ancora realmente visto il nemico. Dopo che l'IgM riconosce l'antigene, i linfociti B che producono queste IgM entrano nel linfonodo, dove vengono addestrati con l'aiuto delle cellule presentanti l'antigene APC (principalmente cellule dendritiche DC) e dei linfociti T helper che sono stati analizzati per l'ostilità. Il salto di qualità del nemico è stato l'illuminazione e l'evoluzione delle cellule B stesse, il che equivale al fatto che il combattente di livello 1 in Civilization IV diventa un combattente di livello 6. Il risultato dell'evoluzione è la differenziazione da linfociti B a plasmacellule, che possono essere secrete in grandi quantità. Gli anticorpi, e l'affinità di questi anticorpi è molto più elevata di quella dell'IgM. Queste sono le IgG. Le IgG esisteranno nel corpo per molto tempo e alcune potrebbero persino esistere per decenni. Tuttavia, le IgM compaiono solo al primo arrivo del patogeno e permangono per circa una settimana. Pertanto, le IgM possono essere utilizzate per indicare se l'organismo si trova in uno stato di infezione acuta.
Dopo aver compreso le regole della risposta anticorpale dell'organismo, sappiamo che se nel sangue umano vengono rilevati anticorpi IgM contro il nuovo coronavirus, è possibile formulare una diagnosi clinica.
Il principio del metodo di cattura delle IgM con carta per test dell'oro colloidale è ben compreso.
La disposizione del foglio di prova è sempre la stessa, ma tutto è diverso in ogni posto——
Il tampone di campionamento viene gocciolato con campioni di sangue (siero), che possono contenere anticorpi IgM contro il nuovo coronavirus, e l'antigene marcato con oro riservato al tampone di legame, anziché l'anticorpo marcato con oro. Questo antigene è una proteina del nuovo coronavirus (espresso in vitro in modo ricombinante). In questo modo, l'IgM si legherà a questo antigene e trasporterà l'oro colloidale. La posizione della linea di rilevamento è l'anticorpo contro l'IgM umana, quindi se c'è IgM nel campione di sangue, una parte di essa verrà intrappolata dall'anticorpo in questo punto, ma se queste IgM non riescono a riconoscere l'antigene del coronavirus marcato con oro sul tampone di legame, il test non svilupperà colore. Quindi questo è il principio della linea di rilevamento.
Per la linea di controllo qualità, ecco l'anticorpo preparato in laboratorio contro l'antigene marcato con oro sul pad di legame. Pertanto, indipendentemente dalla presenza di IgM specifiche nel campione, finché viene aggiunto il mezzo di scorrimento, l'antigene marcato con oro sul pad di legame verrà catturato da questo punto, ovvero la linea di controllo qualità sarà sicuramente colorata. Quindi questo controllo qualità è semplice come quello sopra, dura circa 15 minuti e può essere valutato in base alla resa cromatica delle due linee.
Dopo l'introduzione del principio, il vantaggio più grande dell'oro colloidale è la sua rapidità e praticità.
Ma anche i difetti sono evidenti: la produttività non è elevata e l'accuratezza della carta reattiva dipende fortemente dalla specificità dell'anticorpo. Se la qualità dell'anticorpo non è buona, è facile che si verifichino reazioni crociate e che si verifichino errori di valutazione. Inoltre, il momento della produzione di IgM è successivo a quello della replicazione virale, quindi la finestra di rilevamento non è buona quanto quella del rilevamento degli acidi nucleici.
